靈敏度高是ELISA試劑盒的一大優(yōu)點(diǎn),而這其實(shí)也是和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說(shuō)來(lái),如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問(wèn)題。
一般來(lái)說(shuō),試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫(xiě)的靈敏度。
那么ELISA試劑盒檢測(cè)哪些范圍呢?一般說(shuō)來(lái),診斷試劑的檢測(cè)范圍以ng/ml計(jì)。而常見(jiàn)的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類(lèi)型而變化。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過(guò)文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法確定樣本是否在所購(gòu)試劑盒的范圍內(nèi),如果不在檢測(cè)范圍內(nèi),分兩種情況對(duì)待。
A、如果樣本中目標(biāo)蛋白太低,需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來(lái)檢測(cè)或濃縮樣本;
B、如果樣本中目標(biāo)蛋白太高,則需要進(jìn)一步稀釋后進(jìn)行檢測(cè)
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