來自廣西大學(xué)的趙老師:zui近在做豬的實(shí)驗(yàn),趙老師按照文獻(xiàn)上看到的血清、血漿提取操作方法發(fā)現(xiàn)有的血液離心后,上層液為淡紅色,有的很清涼,但每次采血的方法和步驟都是參考文獻(xiàn)的一樣。麻煩貴公司技術(shù)人員可否去指導(dǎo)分析具體原因,有什么辦法可以得到澄清透明的血清??
我公司技術(shù)人員*時(shí)間去答:取血時(shí)豬是否有掙扎,注射器吸液、放液的速度過快、與抗凝劑的混合手法、抗凝劑的滲透壓都可能照成溶血。
與此同時(shí),技術(shù)指導(dǎo)ELISA實(shí)驗(yàn)血清、血漿樣本正確采集方法:檢測的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。