檢測APLAzui敏感試驗是1983年介紹的ACLA的檢測,后來這種方法得到不斷改進(jìn),血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA):用純心磷脂的無水乙醇溶液(50/11)包被聚苯乙烯反應(yīng)板,常規(guī)方法洗滌后,用10%的BSA封閉;加l:50稀釋的待測血清,37~C孵育30rain;洗板后,再分別加入HRP標(biāo)記的抗人γ(1:1 500)、抗α(1:1 000)、抗μ(1;8 000)鏈的F(ab)2片段,37℃30min然后,OPD顯色,加終止液。492nm波長測吸光度值。結(jié)果以正常對照組平均值±2S為正常上下限。
這種以心磷脂作為靶抗原的ELISA方法,由于交叉反應(yīng),ACLA可能會與其他磷脂結(jié)合。
操作中應(yīng)注意以下事項:避免脫補體作用(加熱血清至56℃),否則會引起假陽性結(jié)果;反復(fù)凍融樣本也會導(dǎo)致ACLA結(jié)合力下降;微孔板也很重要。并且,在包被心磷脂同一板上,還可通過
檢測APLAzui敏感試驗是1983年介紹的ACLA的檢測,后來這種方法得到不斷改進(jìn),血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA):用純心磷脂的無水乙醇溶液(50/11)包被聚苯乙烯反應(yīng)板,4~C;常規(guī)方法洗滌后,用10%的BSA封閉;加l:50稀釋的待測血清,37~C孵育30rain;洗板后,再分別加入HRP標(biāo)記的抗人γ(1:1 500)、抗α(1:1 000)、抗μ(1;8 000)鏈的F(ab)2片段,37℃30min然后,OPD顯色,加終止液。492nm波長測吸光度值。結(jié)果以正常對照組平均值±2S為正常上下限。
這種以心磷脂作為靶抗原的ELISA方法,由于交叉反應(yīng),ACLA可能會與其他磷脂結(jié)合。
操作中應(yīng)注意以下事項:避免脫補體作用(加熱血清至56℃),否則會引起假陽性結(jié)果;反復(fù)凍融樣本也會導(dǎo)致ACLA結(jié)合力下降;微孔板也很重要。并且,在包被心磷脂同一板上,還可通比較加和不加β2-GPI兩微孔問的結(jié)合活性,區(qū)別β2-GPI依賴與不依賴的ACLA。
流式細(xì)胞術(shù)亦被應(yīng)用于ACLA的檢測,可同時檢測APLA同種型。
比較加和不加β2-GPI兩微孔問的結(jié)合活性,區(qū)別β2-GPI依賴與不依賴的ACLA。
流式細(xì)胞術(shù)亦被應(yīng)用于ACLA的檢測,可同時檢測APLA同種型。