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            技術(shù)文獻(xiàn):五味子水提物對(duì)反復(fù)腦缺血再灌注小鼠學(xué)習(xí)記憶及腦能量代謝的影響
            更新時(shí)間:2021-01-21 點(diǎn)擊次數(shù):699

             五味子水提物對(duì)反復(fù)腦缺血再灌注小鼠學(xué)習(xí)記憶及腦能量代謝的影響

             馬素好 李鳳麗 張家梁 ( 鄭州澍青醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校,河南 鄭州 450064)

            〔摘  要〕 目的  探討五味子水提物對(duì)反復(fù)腦缺血再灌注小鼠學(xué)習(xí)記憶及腦能量代謝的影響。方法   將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、尼莫地平組、五味子水堤物大、中、小劑量組,后四組分別灌服尼莫地平混懸液、五味子水提物大、中、小劑量??瞻捉M和模型組給予同體積生理鹽水,每日 1 次,連續(xù)給藥 10 d,采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈夾閉,建立反復(fù)腦缺血再灌注模型。術(shù)后24 h 用避暗法進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè),觀察并記錄小鼠*進(jìn)入暗室的潛伏期及 5 min 內(nèi)進(jìn)入暗室遭電擊的次數(shù)。行為學(xué)檢測(cè)完畢小鼠斷頭取腦,測(cè)乳酸( LD) 、乳酸脫氫酶( LDH) 、乙酰膽堿酯酶( AchE) 活力以及 ATP 酶活力。結(jié)果 與模型組相比,尼莫地平組可以顯著增加小鼠的潛伏期、顯著降低小鼠錯(cuò)誤反應(yīng)發(fā)生的次數(shù)( 均 P < 0. 01) ,五味子水提物大劑量組可以明顯增加小鼠潛伏期并顯著降低小鼠錯(cuò)誤反應(yīng)發(fā)生的次數(shù)( P < 0. 05,P < 0. 01) 。與模型組相比,尼莫地平組、五味子水提物中、小劑量組均可顯著減少小鼠 LD 的含量( P < 0. 01) ,尼莫地平組、五味子水提物大、中劑量組均可以顯著升高小鼠 LDH 的活力( P < 0. 01) ,尼莫地平組、五味子水提物組小劑量均可顯著升高小鼠 AchE 活力( P < 0. 01) ; 與模型組相比,尼莫地平組、五味子水提物大劑量組可以顯著升高小鼠 Na + -K + -ATP 酶活力( P <

             

            0. 01) ,尼莫地平組、五味子水提物大、中劑量組均能顯著升高小鼠 Ca2 + -ATP 酶活力( P < 0. 01) ,尼莫地平組、五味子水提物大劑量組能夠顯著升高小鼠 Ca2 + -Mg2 + -ATP 酶活力( P < 0. 01) 。結(jié)論    五味子水提物可以改善小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力并提高腦組織功能。

            〔關(guān)鍵詞〕 五味子水提物; 反復(fù)腦缺血再灌注; 學(xué)習(xí)記憶; 腦能量代謝

            〔中圖分類號(hào)〕 R285 〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕 A 〔文章編號(hào)〕 1005-9202( 2016) 21-5243-02; doi: 10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2016. 21. 012


            對(duì)于腦血管疾病的治療,目前西醫(yī)僅以改善腦部血循環(huán)、 擴(kuò)血管增加缺血區(qū)血流量、消除腦水腫、降低血液黏滯性、防止血栓延續(xù)等對(duì)癥治療為主〔1〕,但大多西藥都伴隨著嚴(yán)重不良反應(yīng),制約了藥物療效的發(fā)揮和疾病的康復(fù)。中藥在對(duì)抗腦缺血發(fā)作方面有著自己的優(yōu)勢(shì)。五味子性酸、甘、溫,具有收斂、固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心之功效。前期人們重在對(duì)五味子的藥理藥性方面的研究。近年來(lái),有人對(duì)五味子藥理活性也進(jìn)行了研究〔2〕,本實(shí)驗(yàn)研究五味子水提物對(duì)反復(fù)腦缺血再灌注致記憶障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶以及能量代謝的影響。


            1 材料與方法


            1. 1    實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠,體重 19 ~ 22  g,雌雄各半,由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào): 1011023。


            1. 2 試劑 五味子為木蘭科植物五味子( Turcz) 的干燥成熟果實(shí),又稱北五味子〔3〕,該藥購(gòu)自河南皖西制藥有限公司,并經(jīng)專家鑒定為正品。五味子 100  g,經(jīng)水煎煮兩次,合并兩次濾液,濃縮至 200 ml( 1 ml 含生藥 0. 5 g) 。尼莫地平片,生產(chǎn)廠家: 天津市中央藥業(yè)有限公司,規(guī)格 30 mg / 片,批號(hào) 0903108。小鼠條件反射箱,淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。乙酰膽堿酯酶( AChE) 測(cè)試盒,上海恒遠(yuǎn)生物科技有 限公司,批 號(hào)20111012; 乳酸脫氫酶( LDH) 測(cè)試盒,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司,批號(hào) 20110911; 乳酸( LD) 測(cè)試盒,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司,批號(hào) 20111009; ATP 酶測(cè)試盒,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司,批號(hào) 20111101。

             

            1. 3  實(shí)驗(yàn)方法   將 72 只昆明種小鼠隨機(jī)分成 6 組( 雌雄分籠飼養(yǎng)) ,分別為: 空白組、模型組、尼莫地平組、五味子水提物大、中、小劑量組。除空白組和模型組外,給尼莫地平組小鼠灌服

            基金項(xiàng)目: 鄭州市科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目( No. 21PCXTD520)


            第yi作者: 馬素好( 1969-) ,女,在職碩士,主治醫(yī)師,主要從事心腦血管內(nèi)科研究。


            尼莫地平混懸液( 0. 01 g / kg、0. 2 ml /10 g) ,給五味子各組分別灌服五味 子 水 提 物 大、中、小 劑 量 ( 0. 6 g / kg、0. 3 g / kg、

             

            0. 15 g / kg、0. 2 ml /10 g) ??瞻捉M和模型組給予同體積生理鹽水,每日 1 次,連續(xù)給藥 10  d,進(jìn)行手術(shù)。用 10% 的水合氯醛進(jìn)行麻醉,將上述小鼠仰位固定在鼠板上,行頸部切口,分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈,穿線備用。然后用動(dòng)脈夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷血流,10  min之后,松開(kāi)動(dòng)脈夾,使血液再灌注 10  min,反復(fù)進(jìn)行 2次。手術(shù)之后的創(chuàng)口應(yīng)以碘伏消毒,后縫合傷口。術(shù)后24  h,上述各組小鼠均進(jìn)行行為學(xué)測(cè)定( 避暗法)〔4〕,將小鼠頭部背向洞口放入明室,然后通以 25 V 的電壓,同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器,小鼠一進(jìn)入立即受到電擊,而計(jì)時(shí)器則同時(shí)停止計(jì)時(shí)。取出小鼠,記錄每鼠從放入明室至進(jìn)入暗室遇到電擊所需的時(shí)間,此即潛伏期。24 h 后重新測(cè)驗(yàn),記錄潛伏期和 5 min 內(nèi)的電擊次數(shù)。將完成行為學(xué)測(cè)定的小鼠斷頭取腦,其中一半稱重, 加 9 倍的生理鹽水制成 10% 的腦勻漿,以備測(cè) LD、LDH、AchE 活力以及 ATP 酶活力,上述測(cè)定方法均按各自的試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。


            1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS19. 0 軟件進(jìn)行單因素方差分析。

            2 結(jié) 果

             

            2. 1  五味子水提物對(duì)小鼠行為學(xué)的影響( 避暗法)  與空白組相比,模型組可顯著降低小鼠的潛伏期、顯著升高小鼠的錯(cuò)誤 反應(yīng)次數(shù)( 均 P < 0. 01) ,說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)造模成功。與模型組相比,尼莫地平組可以顯著增加小鼠的潛伏期、顯著降低小鼠錯(cuò) 誤反應(yīng)發(fā)生的次數(shù)( 均 P < 0. 01) ,五味子水提物大劑量組可以明顯增加小鼠潛伏期,顯著降低小鼠錯(cuò)誤反應(yīng)發(fā)生的次數(shù)( P < 0. 05,P < 0. 01) 。見(jiàn)表 1。

             

            2. 2 五味子水提物對(duì)小鼠腦組織中 LD、LDH 及 AChE 活力的影響 與空白組相比,模型組能夠顯著提高小鼠 LD 的含量、顯著減少小鼠 LDH 及 AchE 的活力( P < 0. 01) ,說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)造模成功。與模型組相比,尼莫地平組、五味子水提物中、小劑量組

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